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生物顯微鏡的使用(下)

更新時間:2011-12-08   點擊次數:2039次

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生物顯微鏡的使用(下)

(三)反射鏡、費光器的使用方法和對光方法

1.調光

對采用反射鏡的顯微鏡,一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時,才使用凹面反射鏡。采用電光源的顯微鏡,將光亮調合適即可c

2.聚光器的用法

(1)聚光器高度的調節。

一般的聚光鏡.在平行光照射的情況下,其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm線。當使用高倍鏡或油鏡時,內于放大率大,鏡像亮度小,需要較強的照明。因此,應把聚光器升至zui高,以便使聚光鏡的焦點正好落在標本平面亡。侗在使用低倍物鏡時,可將聚光器適當下降。

(2)可變光闌的用法。

可變光欄起兩個作用。一是控制射向標本的光通量;二是改變聚光器的數值孔徑。在這兩個作用中,后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,從原則上說,聚光器的數值孔徑應與物鏡的相同。否則,分辨率或清晰度會受影響。

3.對光方法

對電光源顯微鏡來說,使用時只要將光調節合適的亮度即可,不需要進行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說,要想獲得良好的觀察效果,必須充分利用照明光線。因此,鏡檢之前應先對光。對光時,將低倍鏡旋入光軸,聚光器適當升高,可變光闌開

至zui大。然后,從目鏡中觀察,同時轉動反射鏡.直至視場zui明亮、zui清晰為止。如果利用自然光,則應盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。

(四)物鏡的正確調焦

對光完成后或調節合適光亮后,升高鏡簡或降低載物臺,將標本玻片夾在移動器即標本夾上,并將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央,然后開始調焦。

無論作何種檢查,均應從低倍鏡開始。調焦時,先用粗動手輪將鏡筒下降.使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的丁作距離(5mm以下)。為了避免物鏡壓在標本玻片上,可從側面窺視。然后,一邊從目鏡中觀察視野,一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升,待初見物像后.改用微動手輪作精細調焦,直至物像zui清晰為止。低倍物鏡的視場大,有利于觀察標本的全貌。也可利用移動器或縱、橫向調節手輪尋覓所觀察的目標。如有必要,可將尋得的目標移至視場的中心,為高倍鏡觀察做好準備。

從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時,如果物鏡是顯微鏡的原配,所用的載玻片、蓋玻片又符合標準,一般都可以進行“等高轉換”。即轉換后,只要稍微調節一下微調旋鈕.即可看到清晰的圖像。但油鏡不強求齊焦,先將鏡筒升高后再轉換,zui后按低倍鏡的調焦方法重新調焦。

使用油鏡的方法如下:先將鏡筒升高,取下標本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油小不應有氣泡。如有,可用小木簽扎破),再將標本玻片放回原處,把聚光器升高,使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣,就完成了聚光鏡的伯浸。接著,在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側面窺視.利用粗調使鏡筒盡量下降,直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片)。這樣,又完成了物鏡的油浸。然后,一邊從臼鏡中觀察.一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯了方向,壓碎蓋玻片).直至視野中出現zui清晰的物像為止。

聚光鏡的油浸,還可以采用另一種滴油方法,即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,而是把載玻片翻過來,將油滴在載玻片的底面上,然后再翻過去,對準放置于聚光器上面,再使聚光器上升,來完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手,但比較安全。有人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油.這種方法容易劃傷鏡片,不宜采用。

在使用油鏡時,允許在聚光鏡與標本之間不加香柏油,即聚光鏡上仍以空氣為介質,但這會犧牲物鏡的分辨率。

如用油鏡觀察后,又需要轉回高信物鏡觀察,應將蓋玻片上的油擦去,以免站污高倍物鏡。但聚光器廣的油可以石擦,只要把光闌適當縮小一點即可。

油鏡使用完畢,要及時將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦I—2次,把大部分的油擦掉。然后用二四苯滴濕的擦鏡紙擦2次,zui后用擦鏡紙擦干凈即可。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙覆蓋在玻片上,在紙上滴上—滴二甲苯.趁濕將紙條平拖著拄外拉,連續幾次即可擦干凈。

在整個調焦過程中(尤其是高倍物鏡和油鏡的調焦),每個動作都要緩慢進行。否則,物像一閃而過,找不到觀察的目標。

備注:禁止轉載復制生物顯微鏡的使用(下)文章http://www.cnnoptics.com/

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